As enzimas de restrição são ferramentas biotecnológicas utilizadas em técnicas de biologia molecular e foram descobertas em bactérias que produziam enzimas que seccionavam o DNA viral, gerando resistência à infecção por bacteriófagos. As enzimas de restrição reconhecem determinadas sequências nucleotídicas do DNA e fragmentam a molécula sempre que identificam essa sequência. Elas atuam

A alternativa correta é letra A) identificando determinadas sequências específicas e clivando as ligações entre o grupo hidroxila 3’ de um nucleotídeo e o grupo fosfato 5’ do nucleotídeo adjacente.

a)  identificando determinadas sequências específicas e clivando as ligações entre o grupo hidroxila 3’ de um nucleotídeo e o grupo fosfato 5’ do nucleotídeo adjacente.

CORRETA: As enzimas de restrição são proteínas que atuam como endonucleases, o que significa que elas cortam o DNA em locais específicos no interior da molécula, em oposição às exonucleases, que cortam nas extremidades livres do DNA. A clivagem ocorre entre o grupo hidroxila 3' de um nucleotídeo (um dos componentes do açúcar ribose ou desoxirribose no DNA) e o grupo fosfato 5' do nucleotídeo adjacente. Assim, resulta na quebra da ligação fosfodiéster entre esses nucleotídeos, dividindo a molécula de DNA em fragmentos.

b)  como exonucleases, clivando nucleotídeos do DNA alvo nas extremidades livres.

INCORRETA: As enzimas de restrição não atuam como exonucleases, cortando nucleotídeos do DNA alvo nas extremidades livres. Elas são endonucleases, que cortam o DNA em locais específicos no interior da molécula, como foi comentado na alternativa a).

c)  como endonucleases, pela interação dos aminoácidos do sítio de ligação e as ligações de hidrogênio entre as bases nitrogenadas.

INCORRETA: As enzimas de restrição reconhecem sequências específicas de nucleotídeos no DNA, mas não é pela interação dos aminoácidos do sítio de ligação com as ligações de hidrogênio entre as bases nitrogenadas. A interação das enzimas com as sequências de reconhecimento é mediada principalmente por estruturas tridimensionais específicas que se encaixam nas sequências alvo.

d)  adicionando novos nucleotídeos às sequências coesivas de quatro a seis nucleotídeos, a partir da extremidade 5’ do grupamento fosfato.

INCORRETA: As enzimas de restrição não adicionam novos nucleotídeos a sequências coesivas. Elas cortam o DNA em locais específicos, não adicionam ou modificam nucleotídeos.

e)  como ligases em experimentos de clonagem de DNA, para a inserção de sequências gênicas em plasmídeos bacterianos

INCORRETA: As enzimas de restrição não são ligases. Elas clivam o DNA em locais específicos, enquanto as ligases são enzimas que unem fragmentos de DNA que têm extremidades coesivas complementares.