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O processo de transformação constitui um evento de alta importância na técnica de manipulação gênica. A transformação natural descrita por Griffith, em 1928, e por Avery e colaboradores, em 1944, é um evento raro. No entanto, em 1970, Mandel e Higa encontraram que E. coli tornou-se marcadamente competente para transformação com DNA exógeno, quando a bactéria foi suspensa em cloreto de cálcio gelado e submetida a um curto choque térmico a 42 ºC. Com base neste texto, analise as afirmativas a seguir.I. Estes mesmos autores também verificaram que as bactérias crescidas até a fase log eram mais competentes do que aquelas isoladas de outros estágios do crescimento.II. Para uma boa eficiência de transformação, o procedimento do cloreto de cálcio, usado até hoje, produz uma eficiência que varia de 101 a 103 transformantes por micrograma de DNA intacto.III. O tamanho e a conformação da molécula do DNA afetam o processo de transformação e o DNA linear é mais facilmente incorporado pela célula bacteriana competente.Assinale:

O processo de transformação constitui um evento de alta importância na técnica de manipulação gênica. A transformação natural descrita por Griffith, em 1928, e por Avery e colaboradores, em 1944, é um evento raro. No entanto, em 1970, Mandel e Higa encontraram que E. coli tornou-se marcadamente competente para transformação com DNA exógeno, quando a bactéria foi suspensa em cloreto de cálcio gelado e submetida a um curto choque térmico a 42 ºC. Com base neste texto, analise as afirmativas a seguir.

I. Estes mesmos autores também verificaram que as bactérias crescidas até a fase log eram mais competentes do que aquelas isoladas de outros estágios do crescimento.
II. Para uma boa eficiência de transformação, o procedimento do cloreto de cálcio, usado até hoje, produz uma eficiência que varia de 101 a 10transformantes por micrograma de DNA intacto.
III. O tamanho e a conformação da molécula do DNA afetam o processo de transformação e o DNA linear é mais facilmente incorporado pela célula bacteriana competente.

Assinale:

Resposta:

A alternativa correta é A)

A transformação bacteriana é um fenômeno fundamental na biotecnologia, permitindo a introdução de material genético exógeno em células bacterianas. O texto apresentado aborda os estudos pioneiros de Griffith, Avery e colaboradores, além da contribuição crucial de Mandel e Higa em 1970, que desenvolveram o método do cloreto de cálcio para aumentar a competência bacteriana.

Analisando as afirmativas, observamos que:

A afirmativa I está correta, pois de acordo com o texto, Mandel e Higa constataram que bactérias na fase logarítmica de crescimento apresentam maior competência para transformação. Esse fato é amplamente conhecido na microbiologia, já que células nessa fase estão metabolicamente ativas e mais propensas a incorporar DNA exógeno.

A afirmativa II está incorreta. Embora o método do cloreto de cálcio seja amplamente utilizado até hoje, a eficiência de transformação mencionada (10¹ a 10³ transformantes por micrograma de DNA) está subestimada. Na realidade, protocolos modernos podem alcançar eficiências muito superiores, especialmente quando combinados com outros tratamentos.

A afirmativa III também está incorreta. O texto não menciona qualquer relação entre conformação do DNA e eficiência de transformação. Na prática, o DNA circular (como plasmídeos) é geralmente mais eficientemente incorporado do que o DNA linear, pois é mais estável e menos suscetível a degradação.

Portanto, apenas a afirmativa I está correta, tornando a alternativa A) a resposta adequada. Esse exercício demonstra a importância de uma leitura atenta do texto base e do conhecimento prévio sobre os princípios da transformação bacteriana.

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