Os componentes da parede celular bacterina funcionam como antígenos que são reconhecidos pelo sistema imunológico do hospedeiro. Além disso, interagem com corantes exógenos, permitindo a diferenciação das bactérias pela coloração de Gram. Durante a coloração pelo método de Gram as bactérias Gram-positivas retêm o corante no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não o fazem. O esfregaço bacteriano é considerado Gram-positiva quando:

A alternativa correta é letra D) as bactérias fixadas adquirem coloração azul violeta

A questão aborda conhecimentos relacionados a técnica de coloração de Gram, que possibilita diferenciar bactérias devido a composição da parede celular em:

• gram-positivas (bactérias que possuem uma camada espessa de peptideoglicanos na parede celular);
   
• gram-negativas (bactérias que possuem parede celular predominantemente lipídica, apresentando uma fina de peptideoglicanos).

A técnica consiste na seguinte sequência:

1. Uma etapa inicial de preparo de esfregaço em uma lâmina. Após deixar secar ao ar, deve-se passar a lâmina sobre uma fonte de calor para fixação;
2. Em seguida, faz a coloração com corante cristal-violeta. Este corante cora todas as células de roxo, independente de serem bactérias gram + ou gram -;
3. Aplica-se lugol, um mordente, para fixação da cor.
4. Na sequência, utiliza-se uma solução de álcool para descoloração. Após essa etapa, as células gram-positivas coram-se de roxo/azul violeta e as gram-negativas ficam incolores.
5. Por fim, temos a coloração de contraste, na qual se aplica um segundo corante (chamado de contracorante, secundário ou de fundo), geralmente safranina, que resulta em coloração rósea a vermelha nas células gram-negativas. As gram-positivas permanecem azul violeta/roxas.

Desse modo, a alternativa que contempla corretamente essa sequência é a letra D.